Лыско С.Б. ГНУ «Сибирский НИИ птицеводства» РАСХН, г. Омск
В сперме микробы находят благоприятные условия для роста и размножения. Микроорганизмы выделяют продукты своей жизнедеятельности и токсины, которые снижают выживаемость и оплодотворяющую способность спермиев. Кроме того, в сперме могут содержаться возбудители инфекционных болезней. Для повышения санитарного качества спермы в среды для ее разбавления вводят санирующие вещества. С этой целью используют антибиотики, сульфаниламидные препараты. Однако применение их без учета чувствительности микрофлоры, выделенной из спермы, зачастую не позволяет добиться желаемых результатов. В исследованиях, проведенных нами ранее, был изучен видовой состав микрофлоры спермы петухов-производителей; определена чувствительность выделенных культур к антибактериальным препаратам; сочетание наиболее активных препаратов, усиливающих действие друг друга, было испытано на безвредность для спермиев; определены оптимальные нетоксичные для спермиев дозы испытуемых антибиотиков.
Цель исследования – изучить влияние различных доз испытуемых антибактериальных препаратов на микрофлору спермы петухов-производителей.
Исследования проводились в отделе ветеринарии Сибирского НИИ птицеводства и экспериментально-племенном хозяйстве института. Сперму от петухов получали методом ручного массажа в стерильные спермоприемники. Свежеполученную полисперму делили на пять частей. Разводили сперму 2:1. В одну часть вносили синтетическую среду для разбавления спермы петухов без антибиотиков (контрольная). В три части добавляли среду с испытуемыми антибиотиками в дозах 25 (1 опытная), 50 (2 опытная) и 100 (3 опытная) ЕД/мл. Для сравнения использовали препарат, широко применяемый для санации спермы животных – полиген (ЗАО "Мосагроген") в дозе 600 мкг/мл среды. Средой с полигеном разбавляли оставшуюся часть спермы (4 опытная). Пробы смешивали и хранили при комнатной температуре (20-24ºС). Проводили бактериологическое исследование разбавленной спермы. Определяли общее микробное число в 1 мл разбавленной спермы, коли-титр. Для индикации культур микроорганизмов использовали общепринятые в микробиологии методы с применением обычных (МПБ, МПА) и дифференциальных (Эндо, Кода, ВСА, ЖСА, кровяной агар и др.) питательных сред, а также жидкой и плотной питательных сред для культивирования глюкозоферментирующих микоплазм. Идентификация выделенных культур проводилась по морфологическим, биохимическим, тинкториальным признакам по общепринятым в микробиологии методам. Опыт повторяли четыре раза с последующей статистической обработкой данных.
В результате проведенных исследований установлено, что общее микробное число (ОМЧ) в 1 мл разбавленной спермы без применения антибактериальных препаратов (контрольная группа) составило 4,0•104, коли-титр – 0,001 мл. По морфологическим и биохимическим свойствам выделенные культуры были идентифицированы как M. gallisepticum, E. сoli, Staphylococcus spp, Proteus spp, Citrobacter spp (табл. 1).
Таблица 1
Влияние антибактериальных препаратов на микрофлору спермы петухов-производителей
Группы |
ОМЧ, в 1 мл спермы |
Коли-титр, мл |
Выделенные культуры |
||||
E. coli |
Staphylo-coccus spp |
Proteus spp |
Citro-bacter spp |
M. gallisep-ticum |
|||
Контрольная |
4,0•104 |
0,001 |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
1 опытная |
1,7•104* |
0,01 |
- |
- |
+ |
+ |
+ |
2 опытная |
4,5•102* |
0,1 |
- |
- |
+ |
- |
- |
3 опытная |
- |
- |
- |
- |
- |
- |
- |
4 опытная |
3,0•102* |
- |
- |
+ |
- |
- |
+ |
Примечание: «*» - Р≤0,05, «+» - наличие роста, «-» - отсутствие роста
Наилучшие результаты были получены при применении для санации спермы среды с добавлением испытуемых антибактериальных препаратов в дозе 100 ЕД/мл (3 опытная группа) - отсутствовали условно-патогенные и патогенные микроорганизмы, отрицательный коли-титр и ОМЧ. Использование испытуемых препаратов в дозе 25 ЕД/мл (1 опытная группа) достоверно снижает общее микробное число, при этом отмечали высокий коли-титр - 0,01 мл и выделено значительное количество культур микроорганизмов. Применение антибиотиков в дозе 50 ЕД/мл значительно снижает ОМЧ, коли-титр спермы - 0,1 мл, при идентификации культур был выделен протей.
Применение для санации спермы петухов полигена (4 опытная) снижает общую микробную контаминацию спермы, при этом не оказывает действие на микоплазмы. В единичных случаях в исследуемых пробах была выделена культура стафилококка.
Таким образом, наиболее эффективным способом, позволяющим подавить рост условно-патогенных и патогенных микроорганизмов в сперме петухов-производителей при искусственном осеменении является применение рекомендуемых нами антибактериальных препаратов в дозе 100 ЕД/мл в составе среды-разбавителя.
Список литературы
1. Балашов Н.Г. Ветеринарный контроль при искусственном осеменении животных / Н.Г. Балашов // М. Колос, 1980. - 272 с.
2. Давтян А.Д. Воспроизводство и искусственное осеменение сельскохозяйственной птицы / А.Д. Давтян // Сергиев Посад, 1999. - 239 с.
3. Колычев Н. Сперма быков как фактор передачи энтерококковой инфекции /Н. Колычев, М. Петрова, Л. Лазарева // Ветеринария. - 2006. - № 11. - С. 23-25.
4. Наставление по применению препарата "Полиген" для ветеринарии. - Утвержденное 26 мая 1999 г.
5. Цирукян С.С. О бактерицидной активности новых санирующих препаратов /С.С. Цирукян // Ветеринарный консультант. - 2005.- № 8.- С. 23.Sexton T. A new poultri semen extender. 4. Effect of bacterial contamination in chicken semen / T. Sexton // Poultry Science, 1980. - v. 59. - N 2. - p. 274-281.