С. Гулюшин, В. Ковалёв, лаборатория микотоксикологии ВНИТИП
В настоящее время отмечается возросшая роль микроскопических грибов в патологии сельскохозяйственных животных. Увеличение случаев кормовых отравлений, проявляющихся латентно во многих хозяйствах с определённой регулярностью, заставляет специалистов вновь и вновь обращаться к решению данной проблемы.
К настоящему времени создано достаточно большое количество антитоксических препаратов, но постоянно обсуждается вопрос: каким из них следует отдавать предпочтение при длительном течении токсикоза. Хотя однозначного ответа на него, по-видимому, не существует, большинство исследователей приходят к мысли, что начинать лечение следует с традиционных препаратов — энтеросорбентов, эффективность которых на фоне мягких и умеренных микотоксикозов достаточно высока.
Сегодня сорбенты вновь привлекают внимание учёных. Широкая производственная практика доказала способность некоторых субстанций органического и минерального происхождения связывать и прочно удерживать широкий спектр токсинов различного происхождения.
Зарубежные и отечественные специалисты в опытах in vitro тестировали активированный уголь, смешанные адсорбенты (синтетические полимеры, дрожжи и продукты из дрожжей), местные цеолитсодержащие породы и глинистые минералы. Однако сегодня не выявлено ни одного эффективного сорбента против всех или большинства микотоксинов. Нельзя назвать также и такой, который бы индифферентно относился к биологически активным и лимитирующим факторам питания.
Учитывая, что в доступной литературе практически отсутствует информация об эффективности глинистых минералов ряда российских месторождений и обширной группы активных углей, цель нашего исследования — установить лучшие сорбенты, отличающиеся максимальной способностью поглощать из водных растворов микотоксины.
Работу выполняли в лаборатории микотоксикологии ВНИТИП. Перед исследованиями были приготовлены рабочие растворы микотоксинов (Т-2-токсин, охратоксин А, афлатоксин В1), витаминов (α-токоферол, ретинол, рибофлавин, пантотеновая кислота, пиридоксин) и незаменимых аминокислот (лизин, метионин, триптофан и валин) в концентрациях, наиболее часто обнаруживаемых в кормовом сырье и содержимом пищеварительного тракта. В качестве сорбирующих материалов использовали ряд природных и синтетических энтеросорбентов, допущенных для применения в качестве кормовых добавок — цеолиты, бентониты, вермикулиты, активные угли и полимерные соединения.
Для уточнения сорбционной активности каждый из препаратов был оценен по единой схеме. Для этого к навескам тестируемого сорбента поочерёдно приливали рабочие растворы микотоксинов или питательных веществ, подлежащих сорбции.
Во всех случаях доля сорбента в общей массе раствора составляла 1 процент. Это сопоставимо с введением его в корм на уровне 10 кг/т, что соответствовало рекомендациям для промышленного их использования в рационах птицы. Инкубационные среды выдерживали в водяной бане с температурой 40-41° С при постоянном перемешивании. По истечении 30 минут надосадочную жидкость переносили в отдельные пробирки, центрифугировали для отделения мелких частиц сорбента и определяли остаточное количество вещества по общепринятым методам.
В завершении исследования при сопоставлении значений исходных и обнаруженных концентраций до и после инкубации определяли способность исследуемых сорбентов к поглощению по отношению к трём микотоксинам, а также к биологически активным и лимитирующим факторам питания.
Таким образом, в сравнительном аспекте мы имели вполне объективную оценку, благодаря которой точно установили среднюю степень сорбции тестируемым препаратом разных биологически активных веществ.
Результаты исследования (табл.) показали, что из всех тестируемых сорбентов активированные угли (АУ) обладали самым высоким потенциалом связывания веществ разной химической природы. Так, средние величины сорбции микотоксинов и питательных веществ у них колебались в пределах 42-66 и 37-61%, существенно (в 1,6-1,8 раза) превосходя по этим показателям как органические полимеры, так и глинистые минералы. Большинство АУ в отведённом 30-минутном интервале проявляет большую активность в отношении связывания охратоксина А, чем Т-2-токсина или афлатоксина Вг В целом же безусловными лидерами явились такие марки, как «СКТ-6А», «ВСК-400» и «СДП-420».
Сорбент |
Т-2-токсин |
Охрато-ксин А |
Афлато- ксин В1 |
Средняя сорбция микото-ксинов |
Средняя сорбция витаминов и аминоки-слот |
Коэффициент специфичности |
|
Активированные угли |
|||||||
«СК-6А»* |
48,3 |
96,2 |
62,0 |
66,1 |
43,5 |
1,52 |
|
«ВСК-360» |
40,8 |
71,9 |
49,7 |
52,7 |
47,8 |
1,10 |
|
«СДП-420»* |
38,0 |
97,7 |
50,4 |
57,2 |
49,8 |
1,15 |
|
«БСК-380» |
35,4 |
80,1 |
52,0 |
52,8 |
37,4 |
1,41 |
|
«ВСК-400»* |
31,4 |
97,4 |
66,8 |
58,9 |
47,4 |
1,24 |
|
«АГ-3» |
33,1 |
98,1 |
47,3 |
53,6 |
52,4 |
1,02 |
|
«АР-А»* |
38,3 |
44,3 |
43,3 |
41,9 |
59,8 |
0,70 |
|
«БКС» |
23,0 |
97,9 |
60,5 |
51,4 |
50,0 |
1,03 |
|
«АКУ-ЛВП»** |
27,1 |
85,0 |
54,0 |
49,9 |
51,4 |
0,97 |
|
«ВСК-450» |
32,1 |
96,4 |
46,4 |
52,4 |
61,3 |
0,85 |
|
Глинистые минералы |
|||||||
Грузинский цеолит** |
10,8 |
15,1 |
31,3 |
17,2 |
15,4 |
1,12 |
|
Цеолит Хотынецкий |
21,4 |
24,2 |
44,6 |
28,5 |
20,4 |
1,40 |
|
Цеолит Пегасский |
27,0 |
21,0 |
60,5 |
32,5 |
21,9 |
1,48 |
|
Цеолит Краснокаменский* |
28,1 |
42,3 |
62,3 |
42,0 |
28,8 |
1,46 |
|
Цеолит Вурнарувский |
23,3 |
30,8 |
47,8 |
32,5 |
28,2 |
1,15 |
|
Глауконит Каринский |
25,2 |
13,4 |
42,5 |
24,3 |
20,1 |
1,21 |
|
Глауконитовый песок (30% глауконита, Саратов**) |
19,4 |
18,7 |
20,9 |
19,6 |
17,5 |
1,12 |
|
Вермикулит Татарский* |
27,6 |
30,0 |
61,8 |
37,1 |
24,3 |
1,53 |
|
Вермикулит Ковдорский |
22,9 |
30,2 |
51,5 |
32,9 |
22,1 |
1,49 |
|
Шунгит Зажогинский* |
30,8 |
62,0 |
78,4 |
53,1 |
27,4 |
1,94 |
|
Бентонит (Арамиль)** |
18,3 |
19,8 |
32,0 |
22,6 |
21,7 |
1,04 |
|
Азербайджанский бентонит |
17,4 |
19,7 |
56,9 |
26,9 |
34,1 |
0,79 |
|
Бентонит «Хутор-10» |
19,9 |
28,1 |
50,2 |
30,4 |
24,5 |
1,24 |
|
Бентонит Зырянского |
24,9 |
30,6 |
50,9 |
33,9 |
37,2 |
0,91 |
|
Органические полимерные вещества |
|||||||
Пироллидон** |
16,9 |
40,5 |
34,3 |
28,6 |
31,4 |
0,91 |
|
Отруби ржаные |
27,9 |
51,5 |
46,9 |
40,7 |
37,0 |
1,1 |
|
Карбоксиметилцеллюлоза |
21,1 |
36,7 |
37,8 |
30,8 |
28,0 |
1,1 |
|
Лигнин (лиственница)* |
25,5 |
39,1 |
52,4 |
37,4 |
24,4 |
1,53 |
Примечание: *предпочтительные, **нежелательные
Важно отметить, что при соотношении показателей сорбции ксенобиотиков и нутриентов, карболены «СКТ-6А», «ВСК-380» и «БСК-400» отличались не только высокой сорбцией микотоксинов, но и минимальным поглощением питательных веществ, что делает их использование для профилактики микотоксикозов более предпочтительным по сравнению с другими аналогами. Например, «АР-А» и «АКУ-ЛВП» были не только инертны в связывании микотоксинов, но и проявляли больший интерес к биологически активным и лимитирующим факторам питания, что приводит к нежелательным последствиям.
Таким образом, акцентируя внимание на целесообразности использования АУ в профилактике микотоксикозов, стоит отметить, что адсорбция витаминов и аминокислот остаётся на достаточно высоком уровне даже у перспективных марок. В контексте данной работы попытка научно обоснованного выбора угольного сорбента, позволяющего не усугублять снижение питательной и биологической ценности рационов, возможно, будет иметь перспективы.
Однако нужно помнить, что и от других условий — наличия и концентрации токсических агентов в скармливаемом корме, режима периодичности включения АУ, контроля обеспеченности и дополнительного обогащения рационов витаминно-минеральными комплексами, а также совокупности иных факторов — будет зависеть результативность лечебного мероприятия в целом.
Для профилактики кормовых отравлений животных и птицы принято использовать небольшие дозы АУ — не более 5-1 0 кг/т. АУ являются гидрофобными сорбентами с высокой сорбционной ёмкостью, которые, обладая большой развитой поверхностью и разным объёмом пор, способны эффективно поглощать как полярные, так и неполярные ксенобиотики, что является залогом их эффективности и востребованности.
Не менее известными субстанциями, успешно зарекомендовавшими себя с положительной стороны в практике кормления, являются глинистые минералы (цеолиты, бентониты, глаукониты, вермикулиты и пр.). Природа естественных сорбентов чрезвычайно разнообразна. Основные различия проявляются в химическом составе, благодаря чему отмечается колоссальное разнообразие физических форм и внутренней организации. Вследствие этого те или иные уникальные сорбционные свойства могут быть присущи конкретному образцу из конкретного месторождения.
Результаты проведённого исследования подтвердили, что у природных минералов эффективность сорбции разных субстратов от максимального до минимального значения отличалась в 3-5 раз.
К примеру, шунгит Зажогинского (Республика Карелия), цеолит Краснокаменского (Читинская область), бентонит Зырянского (Республика Хакасия), вермикулит Татарского (Красноярский край), цеолит Вурнавурского (Республика Чувашия), вермикулит Ковдорского (Мурманская область), а также бентонит Азербайджанского и цеолит Пегасского (Кемеровская область) месторождений имели достаточно высокие показатели сорбции, практически не уступающие некоторым распространённым коммерческим препаратам.
Вполне показательно, что практически все глинистые минералы отличала активная сорбция афлатоксина и аминокислот— веществ, имеющих полярную природу, однако многие протестированные в опыте сорбенты (шунгит, вермикулиты и цеолиты) отличались узкими предпочтениями к микотоксинам, имели меньшую активность в отношении витаминов и аминокислот.
Таким образом, на основании комплексной оценки in vitro уже сейчас для профилактики микотоксикозов можно рекомендовать трёх лидеров: шунгит Зажогинского, вермикулит Татарского и цеолит Краснокаменского месторождений. Включение их в недоброкачественные комбикорма (с учётом гораздо более выгодной стоимости по сравнению с импортными аналогами) гарантирует высокую экономическую результативность.
В порядке обсуждения полученных результатов стоит обратить внимание на то, что особенность глинистых материалов — высвобождение части макро- и микроэлементов под действием кислой среды желудка, поэтому практически все они используются в качестве минеральных кормовых добавок. Однако неизбежно возникающая при этом деструкция пространственной структуры алюмосиликата, изменение объёма пор и сорбционных свойств материала нередко приводят к несоответствию между результатами in vitro и in vivo.
Наглядным примером могут служить ржаные отруби, которые хотя и эффективно поглощают микотоксины, но частично перевариваясь в ЖКТ, снова высвобождают поглощённые ксенобиотики в просвет кишечника, где всасываются, и попадают в организм животных. Именно поэтому их редко используют в профилактике кормовых отравлений, в отличие от субстанций с предварительно проведённой кислотно-щелочной обработкой (лигнины).
Выход из такой ситуации — увеличение уровня ввода глинистых минералов: для профилактики острых и хронических микотоксикозов не ниже 2-4% (20-40 кг/т).
Некоторые специалисты часто высказывают мнение, что такие «высокие уровни ведут к эффекту разбалансировки комбикормов, сопровождаются снижением питательности рационов, экскрецией лимитирующих факторов и пагубным механическим воздействием на эпителий пищеварительного тракта, что лишь усугубляет состояние здоровья». Несомненно, опасения такого рода имеют право на существование и должны быть всесторонне исследованы соответствующими опытами на репрезентативном поголовье животных.
Однако для скептиков применения глинистых минералов можно привести ряд контраргументов. Во-первых, погрешности при составлении комбикормов между рекомендуемым и фактическим уровнем питательности ниже 3% не способны негативно влиять на продуктивность животных, а следовательно, рассуждения о разбалансировке рационов в пределах этой величины имеют зыбкую почву и легко компенсируются адаптационными возможностями животных.
Во-вторых, в зависимости от степени токсичности выбор эффективного сорбента позволяет реально снизить уровень его включения в загрязнённый комбикорм (до 1-2%) без снижения лечебного эффекта, но с существенной минимизацией нежелательных последствий.
И, наконец, не многие специалисты, занимающиеся проблемой микотоксикологии, обращают внимание на то, что необходимость усиленной экскреции из организма животных продуктов аномального обмена при выраженном течении патологического процесса многократно превалирует над адекватным его обеспечением питательными веществами; дополнительное очищение организма необходимо как сопутствующее мероприятие эфферентной терапии. В настоящее время приходится лишь констатировать, что ни один препарат в качестве «узконаправленного элиминатора микотоксинов» в рекомендуемых уровнях ввода (до 2 кг/т) не способен вывести из организма какую-либо существенную долю конечных и промежуточных продуктов обмена; это под силу лишь глинистым минералам (20-40 кг/т), не обладающим выраженной специфичностью.
На основании проведённого исследования можно сделать вывод: потенциал веществ, перспективных для использования в качестве энтеросорбентов, велик, многообразен, но до конца не изучен. Такой богатый ассортимент природных ископаемых и материалов, полученных технологическим путём, накладывает серьёзные обязательства как на учёных, так и на практиков по выявлению и рациональному использованию тех субстанций, которые окажутся наиболее подходящими для профилактики кормовых отравлений.
Практика показала, что многие сорбенты отечественного производства не уступают импортным, а некоторые превосходят их. В современных реалиях промышленного производства безусловные предпочтения нужно отдавать сорбентам, прошедшим комплексное тестирование и отвечающим требованиям безопасности.
Статья была опубликована в журнале «Птицеводство», 2009г.