Копилка -Пасека... Страница 2 из 2

Тетерев, 1975, 1976; Ю.С.Александров, Л. Н.Данилов, 1975; Г. А. Белозерова, 1976; В. И. Горшунова, 1973; С. Ш. Турсуналиев, 1990) и другие. В многочисленных опытах установлено, что различные виды микроорганизмов проявляют разную чувствительность к прополису. Например, в опытах В. П. Кивалкиной пастереллы на пластинках из нативного прополиса погибали через 5-20 минут, соответственно, возбудитель рожи свиней, гемолитический стрептококк -10-60 минут, стафилококки - 0,5-6 часов, сальмонеллы - 1-6 часов, эшерихии - 2-6 часов, синегнойная, чудесная палочки - 2-8 часов. Бактериостатические концентрации прополиса колебались в зависимости от вида микроорганизмов от 0,0005 до 0,1 г сухого вещества экстрагированного прополиса на 1 мл питательной среды. А. А. Барсков (1988) отмечает, что одним из объективных критериев при оценке качества прополиса являются его антимикробные свойства. В опытах с 40 образцами прополиса, собранными в различных зонах России, бактериостатическое действие прополиса проявлялось в отношении Вас. subtilis L-2, Mycobacterium B-5 в дозах от 62,5 до 250 мкг/мл, Staphylococcus aureus 209-P - от 62,5 до 500 мкг/мл, Escherchia coli О 55-4-6 мг/мл. Антимикробное действие проявляют препараты, приготовленные с использованием прополиса (мази, экстракты, водно-спиртовые эмульсии, прополисовые масла, биогели и другие). В 1959 г. В. П. Кивалкина сообщила, что воск из прополиса обладает выраженным бактерицидным действием, однако противомикробная активность воска несколько ниже таковой прополиса. В отличие от воска прополисовые мази в опытах В. П. Кивалкиной обладали более выраженной бактерицидной активностью в сравнении с прополисом. Мазь, приготовленная на беленом масле, более бактерицидна по сравнению с мазью, приготовленной на вазелиновом масле. Бактерицидным и бактериостатическим действием обладают водный (1:2) и спиртовой (1:5) экстракты (3. X. Каримова и другие, 1963). В опытах по применению прополиса при выращивании цыплят нами были изучены бактерицидные свойства водно-спиртовой эмульсии прополиса в отношении семи культур сальмонелл (S. gallinarum, S. dublin, S. cholerae-suis, S. typhimurium, S. abortus-equi, S. abortus-ovis, S. enteritidis) и шести культур энтеропатогенных эшерихий, выделенных из тушек цыплят. Бактерицидная концентрация спиртового экстракта прополиса в составе водно-спиртовой эмульсии в отношении сальмонелл составила 1,3 ± 0,22, а в отношении эшерихий 1,2 ± 0,31 %. При изучении антимикробного действия прополисовых гелей, приготовленных на основе агар-агара, желатина, крахмала, натрий-карбоксиметилцеллюлозы бактерицидные концентрации в отношении Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Bacillus cereus, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli, S. dublin варьировали в пределах 5-10 мг/мл сухого, экстрагированного спиртом, вещества прополиса. Многие исследователи отмечают более высокую чувствительность к препаратам прополиса грампозитивной бактериальной микрофлоры в сравнении с грамнегативной. При изучении бактерицидных свойств прополиса, собранного в Кировской области, нами были сделаны выводы, подтверждающие более высокую чувствительность грамположительной сапрофитной микрофлоры в сравнении с грамотрицательной и индивидуальную (штаммовую) чувствительность к прополису (И. И. Тетерев, 1976).

В отношении вирулицидного действия прополиса сведения в литературе весьма скромны. Ингибирующее действие прополиса на вирусы мозаики огурца, пятнистости табака, некроза табака, мозаики табака было установлено В. Бойнянским и В. Косляровой (1975). Самая высокая чувствительность была обнаружена у вируса некроза табака, а самая низкая - у вируса мозаики огурца. Прополис сокращает число повреждений на контаминированных вирусом листьях, затормаживает репродукцию вируса во всем растении, проявляет высокую ингибирующую активность при пониженных его концентрациях, что может иметь значение для использования его в практике мероприятий по защите культур.

Г. А. Белозерова (1976) при изучении влияния препаратов прополиса на вирус болезни Ауески делает вывод о том, что препараты прополиса in vitro обладают ингибирующим действием. Водно-спиртовая эмульсия в дозе 15 мг/мл и водный экстракт прополиса в дозе 6 мг/мл снижали титры вируса в культуре клеток ПП по сравнению с контролем на 3,5 и 4,0 Ig ТЦД50, в куриных эмбрионах - на 2,0 и 1,75 Ig ЛД50. Г. П. Демаков, И. И. Тетерев (1978) в опытах по изучению влияния прополиса наРНК-содержащие вирусы болезни Ньюкасла и гепатита утят установили, что водный экстракт прополиса с содержанием сухого вещества 25 мг/мл инактивирует вирус болезни Ньюкасла в течение 5-15 минут, в то время как вирус гепатита утят был резистентен, даже в условиях непосредственного контакта с нативньм прополисом. По-видимому различная чувствительность к прополису объясняется тем, что вирус болезни Ньюкасла имеет липопротеидную суперкапсидную оболочку и под действием прополиса происходит блокировка рецепторов вируса и ингибирование его способности адсорбироваться на чувствительных клетках. Энтеровирус гепатита утят лишен липопротеидной оболочки и прополис не оказывает на него противовирусного действия.

Наряду с антибактериальными и антивирусными свойствами прополис и его препараты проявляют выраженное фунгицидное действие (Т. В. Вахонина, 1975; Л. Въехет, 1975; А. А. Барсков, 1980). Высокую и умеренную чувствительность к прополису Л. Въехет установил у грибов Fusarium solani, Cloeckera apiculata, Saccharomyces cerevisiae, в то время как Aspergillusochraceus оказались малочувствительными. Ингибирующая зона прополиса в отношении Cloeckera apiculata составила 9,2-12 мм, Saccharomyces cerevisiae - 9,5-11 мм, Candida albicans - 8,5-9 мм. Фунгиостатическое действие различных образцов прополиса на плесневые и дрожжеподобные грибы в 80% случаев проявлялось в дозах 6-8 мг/мл; 7,5%-4 и 12,5%-10 мг/мл (А. А. Барсков, 1988).

Интересные наблюдения сделаны А. А. Барсковым (1984) при сравнительном изучении чувствительности стафилококков и стрептококков, выделенных из секрета вымени больных маститом и здоровых коров, к антибиотикам и прополису. Если среди культур стафилококков и стрептококков были антибиотикочувствительные и антибиотикорезистентные, то по отношению к прополису как те, так и другие проявляли чувствительность в равной или почти равной степени. Например, бактериостатические концентрации прополиса составили для антибиотикочувствительных стафилококков 150 ± 26,6 мкг/мл, а для антибиотикорезистентных стафилококков - 169 ± 22,7 мкг/мл, соответственно, для антибиотикочувствительных стрептококков - 81 ± 20,9 мкг/ мл, а для антибиотикорезистентных стрептококков - 75 ±23,7 мкг/мл.

В опытах по изучению антимикробного действия прополиса и антибиотиков В. И. Горшунова(1973), П. Я. Соркин, В. А. Вяхирев (1974), С. Ш. Турсуналиев (1990) отмечают повышение чувствительности микроорганизмов при сочетанном применении суббактериостатических концентраций прополиса и антибиотиков. Например, С. Ш. Турсуналиев сообщает, что минимальная бактериостатическая концентрация дибиомицина для эшерихий составляла 0,04 ЕД/мл, а на среде с суббактериостати-ческой концентрацией прополиса - 0,005 ЕД/мл.

В. П. Кивалкина (1959), Н. П. Иойриш (цитировано по К. Янешу,1975), И. И. Тетерев (1975) и другие исследователи экспериментально установили устойчивость прополиса к высоким температурам. Даже стерилизация в автоклаве при давлении пара в одну атмосферу в течение 20 минут не лишает препараты прополиса антимикробных свойств.

А. А. Барсков, Н. И. Губкина, В. А. Талан (1975) изучали антимикробную активность 7 фракций прополиса в сравнении со спиртовым экстрактом прополиса. Все фракции были более активны по отношению к Bacillus subtilis L-2, штамму вакцины Ценковского, Staph. aureus 209, чем спиртовый экстракт прополиса. Бактериостатическая концентрация эфирных масел для Bacillus subtilis составила 2 мкг/мл, соответственно, флавоноидов в сочетании с нейтральными продуктами - 30 мкг/ мл, фенолокислот - 60 мкг/мл, а спиртового экстракта прополиса - 125 мкг/мл; для, Staph. aureus 30, и 250 мкг/мл.

Таким образом, из анализа далеко не полного перечня результатов экспериментальных исследований отечественных и иностранных авторов можно сделать обобщение о том, что прополис обладает выраженным с широким спектром антимикробным действием в нативном состоянии и в составе препаратов. Прополис усиливает антимикробное действие антибиотиков, а действие высоких температур не отражается на его антимикробных свойствах. При длительном применении препаратов прополиса не установлено появление прополисорезистентных штаммов микроорганизмов.

В связи с изучением химического состава прополиса и индикации в его составе флавоноидов, обладающих антиокислительными свойствами, были изучены таковые и у прополиса. В 1920 г. Н. В. Анашина сообщила о том, что добавка 1% светлой фракции прополиса к непищевым жирам увеличивает срок их хранения в 18 раз, 0,1% - в 12 раз и может быть рекомендована для консервирования непищевых жиров. В опытах В. Н. Ушаковой и Т. П. Мурыхнич (1973) флавоноиды, извлеченные из прополиса, в концентрации 0,2% значительно замедляли поглощение кислорода олеиновой кислотой. Ими разработан и внедрен в промышленность способ обработки рыбы, позволяющий увеличить сроки ее хранения в 2-3 раза. Изучение антиокислительных свойств прополиса представляет интерес не только для некоторых отраслей пищевой промышленности и парфюмерии, но также для медицины и биологии.

В. Н. Присич (1975) установил дезодорирующее свойство прополиса. В опытах с тампонами содержимого уха больных хроническим гнойным отитом и кусочками мяса с гнилостным запахом, погруженными в 20%-й раствор прополиса, устранялись неприятные запахи. Дезодорирующую способность прополиса В. Н. Присич связывает с сильным бактерицидным и бактериостатическим действием, обволакивающим свойством, а также сравнительно сильным бальзамическим запахом.

ДЕЙСТВИЕ ПРОПОЛИСА НА ОРГАНИЗМ ЖИВОТНЫХ И ЧЕЛОВЕКА

В связи с повышенным интересом к прополису, как к перспективному фармацевтическому сырью, исследования его в 50-60-х годах были сосредоточены на изучении не только антимикробных свойств и химического состава, но и безвредности для организма животных и человека.

В 1959 г. В. П. Кивалкиной опубликованы результаты испытаний препаратов прополиса на безвредность. Водные экстракты прополиса (от 1:10 до 1:100) при внутрибрюшинном и подкожном введениях в больших дозах (до 10 мл) были безвредны для организма лабораторных животных. Однако, как отмечает В. П. Кивалкина, введение неразведенного и сильно концентрированного (1:1) перегона прополиса вызывает некроз ткани в области введения препарата и даже гибель животных. А. А. Аристов (1962) скармливал кроликам прополисовое молоко (5-40%-й концентрации) в дозах от 5 до 600 мл в сутки и установил, что «при внутреннем применении кроликам оказалось безвредным». В одном из выводов статьи А. А. Аристов резюмирует: «Применение 5-40%-го прополисового молока в больших дозах (до 600 мл) в наших опытах на кроликах не вызывало какого-либо клинически видимого влияния на общее состояние кроликов и состав их крови, а также не нарушало воспроизводительной функции у самок». Безвредность прополисового молока для животных подтверждена И. Ф. Казаковым (1962) в опытах на ягнятах и поросятах, экстракта прополиса С. Г. Покровским (1962) в опытах на утятах. В последующие годы при разработке лечебно-профилактических препаратов многие исследователи отмечали безвредность для животных разных видов прополиса, включенного в состав этих препаратов (В. А. Балалыкин, 1969; А. В. Дунявин, 1969; В. И. Пионтковский, 1970; И. И. Тетерев, 1970; А. И. Балалыкина, 1972; Э. Л. Бударкова, 1972; Г. А. Белозерова, 1976; В. П. Кивалкина, А. А. Барсков, М. Г. Миролюбов, А. С. Аладышкин, 1978; Р. Т. Маннапова, 1984; А. А. Барсков, 1988; С. Ш. Турсуналиев, 1990 и другие).

В опытах по изучению токсичности прополиссодержащих препаратов биогель 5 и биогель 10 на десятках лабораторных животных (белые мыши, морские свинки, кролики) мы ни в одном случае при введении максимально переносимых доз не наблюдали гибели животных, а лишь отмечали легкое угнетение, а затем кратковременный наркоз в связи с наличием в составе препаратов этанола. Располагая богатым экспериментальным материалом по применению препаратов прополиса в ветеринарии, А. А. Барсков (1988) пишет: «Препараты прополиса (он работал с настойками, экстрактами, суспензиями, растворами при внутреннем и аэрозольном применении, линиментами, мазями, суппозиториями при наружном и внутриполостном введении - И. Т.) не токсичны, не вызывают раздражающего действия и при внутривымянном введении не влияют на качество молока. Противопоказания к их применению не установлены».

Исключительно ценными и практически значимыми являются результаты исследований по изучению влияния прополиса на обменные процессы в организме животных. Изучая влияние прополиса на некоторые иммунобиологические показатели здоровых и экспериментально зараженных уток С. Г. Покровский (1965) установил, что применение водного экстракта прополиса способствует увеличению количества общего белка в сыворотке крови здоровых уток с 3,8 до 4,4 г% и гамма-глобулинов с 25,7 до 34,2%. Содержание альбуминов незначительно и постепенно снижалось, а в отношении бета-глобулинов закономерных изменений не установлено. В. А. Балалыкин (1969) при иммунизации сальмонеллезным формолантигеном с прополисом кроликов не наблюдал увеличения количества общего белка и отмечал увеличение содержания в сыворотке крови альфа- и бета-глобулинов.

В наших опытах (И. И. Тетерев, 1970) у телят, иммунизированных сальмонеллезной вакциной с маслянопропо-лисным адъювантом, содержание общего белка, альбуминов, альфа- и бета-глобулинов сохранялось на уровне телят контрольной группы и наблюдалась выраженная стимуляция синтеза гамма-глобулинов. В 1994-1995 гг. нами выполнены исследования по изучению влияния скармливания водно-спиртовой эмульсии прополиса на минеральный и белковый обмен у поросят. Из анализа результатов опытов (И. И. Тетерев, В. И. Белорыбкин, 1995) следует, что в содержании фосфора, кальция, магния, и белка в крови у животных опытной и контрольной групп существенных различий нет. В то же время содержание мочевины у поросят опытной группы было в пределах физиологической нормы (20-28 мг%), а у животных контрольной группы наблюдались выраженная уремия (49,7 мг%). Нормализация содержания мочевины в сыворотке крови животных, получавших водно-спиртовую эмульсию прополиса, свидетельствует о хорошем усвоении белка и оптимизации белкового обмена. Применение прополиссодержащих препаратов не вызывает достоверных изменений в составе крови. Например, Р. Т. Маннапова (1982) сообщает, что в периферической крови кроликов через 10 дней с начала курса введения полиэтиленгликолевого раствора прополиса отмечался умеренный лейкоцитоз, эритремия и небольшой сдвиг соотношения форменных элементов белой крови в виде уменьшения количества палочкоядерных и сегментоядерных нейтрофилов и увеличения содержания лимфоцитов. Заметных макроскопических и гистологических изменений в сердце, легких, печени, желудке и кишечнике опытных животных в отличие от контрольных не наблюдали. К концу наблюдений (через 1 месяц) все указанные отклонения в морфологических показателях крови нормализовались и приблизились к их уровню у контрольных животных.

В наших опытах по применению водно-спиртовой эмульсии прополиса для профилактики диареи новорожденных телят гематограмма у животных опытной группы была в пределах нормы и отражала закономерные изменения возрастного характера, в то же время, у телят контрольной группы содержание эритроцитов и лейкоцитов было повышенным в результате сильной дегидратации организма, обусловленной диареей (И. И. Тетерев, В. Н. Усов, Н. А. Савельева, 1993).

Прополис интенсифицирует обмен веществ в организме животных, что проявляется в стимуляции их роста и развития. Более подробно результаты исследований по применению прополиса для этих целей будут изложены в соответствующем разделе книги.

Ш. Кэлэуз, М. Корчог (1982) установили участие прополиса в регуляции эндокринной системы: влияет непосредственно на систему гипофиз - кора надпочечников, способствует выделению кортикостероидов и подавляет активность вилочковой и панкреатической желез.

В 1957 г. Н. Н. Прокопович (цитировано по Н. П. Иойришу, 1966) сообщил об экспериментальных работах по изучению местного анестезирующего действия прополиса. Исследования показали, что анестезирующая сила 0,25%-го раствора прополиса превосходит действие кокаина и новокаина. Из опытов следует, что анестезирующее действие обеспечивают эфирные масла прополиса. 0,25%-й раствор эфирного масла прополиса вызывает полную анестезию в течение 12,5 минут. Раствор прополиса той же концентрации после отгонки эфирного масла анестезирующим действием не обладал. В опытах Ц. Цакова(1975) при проведении полостных операций на овцах и собаках подтверждены анестезирующие свойства прополиса как при общем, так и при местном применении водных гидроспиртовых экстрактов прополиса. При пероральном применении спиртового экстракта прополиса Ц. Цаков отмечает, что через 15-20 минут наступает хорошая анестезия. При интраперитонеальном введении водного экстракта прополиса получен такой же анестезирующий эффект как и при пероральном. У овец, которым сделали лапаротомию после местного применения прополиса, эффект анестезии проявился через 2-5 минут после применения и продолжался 45 минут. У собаки, анестезированной прополисом с 0,25%-м новокаином в пропорции 1:1, анестезия наступала быстрее (через 1 -2 минуты) и условия для операции были лучше. На основании результатов опытов Ц. Цаков делает выводы о том, что анестезия гидроспиртовым экстрактом прополиса, примененным местно в виде инфильтрации, аналогична анестезии 5% раствором новокаина. Прополис хорошо анестезирует область предстоящей операции, если применять его водный экстракт 1:1. Спиртовой экстракт прополиса, применяемый перорально из расчета 0,012 г/кг веса, оказывает хороший анестезирующий эффект. Независимо от способа применения экстракты прополиса не оказывали отрицательного влияния на животных даже в послеоперационном периоде.

Хорошее местное анестезирующее действие 2-4%-го спиртового раствора прополиса отметили В. С. Шевченко, Ф. Л. Шульман (1969) при гиперестезии твердых тканей зуба, при обезболивании патологических десновых карманов, а водный экстракт прополиса (30 г прополиса на 100 мл дистиллированной воды) при применении в виде аппликаций в чистом виде или в виде кашицы с белой глиной устраняет жжение, боль, стимулирует эпите-лизацию эрозий и трещин при лечении заеды, кандидомикозе слизистой оболочки ротовой полости, хейлитах, глоссальгии. 3. Г. Чанышев (1963) применял с лечебной целью 15%-ю прополисовую мазь на вазелине с ланолином при ящурных поражениях кожи сосков у коров. Через 10-15 минут после нанесения мази животные при дойке не проявляли беспокойства. Анастезирующее действие прополисовой мази продолжалось более двух часов и не уступало таковому новокаиновой мази. Заживление пораженных участков кожи сосков при использовании прополисовой мази наступало в течение 3-16 дней в зависимости от степени поражения. И это далеко не полный перечень опубликованных материалов научных исследований и наблюдений из практической ветеринарии и медицины, подтверждающих обезболивающие свойства прополиса.

В последние три десятилетия внимание исследователей привлекает способность препаратов прополиса стимулировать факторы естественной резистентности и иммунитета. В 1963 г. на Всесоюзной конференции, посвященной 90-летию Казанского ветеринарного института В. П. Кивалкина сообщила, что прополис повышает комплементарную активность, ускоряет процесс фагоцитоза, увеличивает количество пропердина и стимулирует антителообразование. Это сообщение определило новое направление в изучении прополиса. В 1968 г. В. А. Балалыкин изучал влияние паратифозного антигена с прополисным адъювантом на активность комплемента и лизоцима кроликов. У животных, обработанных антигеном с прополисом, исходное количество комплемента по группе выражалось величиной 1:11, а на 30-й и 106-й дни после иммунизации титр комплемента у них равнялся разведению сыворотки 1:20; через 140-196 дней были зарегистрированы самые высокие титры, которые, соответственно, выражались отношениями 1:25 и 1:28. В других группах (с полным и неполным адъювантами Фрейнда-И.Т.) подобного увеличения активности комплемента не наблюдалось. Содержание лизоцима в сыворотке крови кроликов, иммунизированных антигеном с прополисным стимулятором, повышалось на 10-й день после вакцинации с 1:76 до 1:107, а на 30-й, 40-й и 50-й дни регистрировалось резкое уменьшение этого фермента. В контрольных группах животных, вакцинированных тем же антигеном с адъювантами Фрейнда и антигеном без адъюванта содержание лизоцима после иммунизации снижалось во все дни исследований. О повышении комплементарной активности сыворотки крови различных видов животных, иммунизированных различными антигенами в сочетании с прополисным адъювантом, сообщали А. И. Балалыкина (1970), Э. Л. Бударкова, В. П. Кивалкина (1971), С. Ш.Турсуналиев(1990) и другие исследователи. Установлено стимулирующее действие прополиса на фагоцитарную реакцию организма животных (А. В. Дунявин, 1967; И. И. Тетерев, 1969; В. П. Кивалкина, А. А. Барсков, Э. Л. Бударкова, 1980 и другие). В 1969 году мы изучали влияние прополиса на поствакцинальную фагоцитарную реакцию телят, иммунизированных концентрированной формолвакциной с прополисом из расчета 5 мг (первая группа) и 12,5 мг прополисного бальзама (вторая группа) на килограмм живой массы животного. Контролем служили вакцинированные той же вакциной, но без прополиса (третья группа) и невакцинированные животные (четвертая группа). Схема и результаты опыта приведены в табл. 1.

Таблица 1

Влияние прополиса на поствакцинальную фагоцитарную реакцию нейтрофилов, у иммунизированных против паратифа телят

Группа животных
Вакцина
Доза (мл)
Кратность введения
Показатель фагоцитарной активности нейтрофилов

до вакцинации
после вакцинации через (дней)

15
30
45
60
90
120

1
Концентрированная формолквасцовая с прополисом
1,0
1
2,2
7,7
15,6
18,8
21,7
25,3
16,2

2
То же
1,0-1,5
2
2,1
13,7
20,4
27,0
28,8
24,8
18,6

3
То же без прополиса
1,0-1,5
2
1,9
8,5
16,4
20,8
17,9
11,2
7,2

4
Не вакцинировали
-
-
2,6
3,3
3,8
3,8
3,5
3,2
3,5

При выполнении опыта установлена безвредность формолквасцовой вакцины против паратифа с прополисом для телят. Из 20 телят, привитых вакциной с прополисом в пятисуточном возрасте, ни у одного животного не было отмечено выраженных поствакцинальных осложнений. Из приведенных в таблице данных опыта видно, что прополис в составе вакцины против паратифа стимулирует фагоцитарную активность нейтрофилов в первые дни после вакцинации телят. Показатель фагоцитарной активности нейтрофилов через 15 дней после вакцинации у телят второй группы был равен 13,7, в то время как у телят третьей группы - 8,5. В первой группе телят нарастание фагоцитарной реакции продолжалось до трех месяцев, тогда как у телят второй группы верхняя граница фагоцитарной реакции отмечена через два месяца и третьей группы - через полтора месяца после вакцинации. Эти результаты позволяют предположить пролонгирование поствакцинальной фагоцитарной реакции прополисом. Выравнивание показателей фагоцитоза у телят первой и второй групп косвенно указывает на оптимальные стимулирующие фагоцитоз дозы прополиса (5 мг сухих экстрактивных веществ прополиса на один килограмм живой массы животного). Начиная с 60-го дня поствакцинального периода показатель фагоцитарной активности нейтрофилов у телят первой группы был выше, чем у телят третьей группы, причем через 3 и 4 месяца после вакцинации эта разница увеличилась почти в 2,3 раза. Незначительная разница в показателях фагоцитарной активности нейтрофилов у телят первой и третьей групп через 15, 30 и 45 дней после вакцинации объясняется кратностью и количеством введенного антигена. Фагоцитарная активность нейтрофилов у не вакцинированных телят (четвертая группа) на протяжении опыта была без существенных колебаний. Обобщая результаты опыта, мы сделали вывод о том, что прополис в составе вакцины против паратифа стимулирует фагоцитарную активность нейтрофилов и пролонгирует поствакцинальную стимуляцию фагоцитоза у телят.

Одним из показателей, объективно отражающих состояние естественной резистентности организма животных, является бактерицидная активность сыворотки крови. При изучении иммуностимулирующих свойств прополиса некоторые исследователи в своей работе небезуспешно пользовались этим тестом (Р. Т. Маннапова, 1982; В. П. Кивалкина, А. А. Барсков, Э. Л. Бударкова, И. Н. Исмагилов, 1980; В. П. Кивалкина, С. Ш. Турсуналиев, 1988 и другие). В опытах В. П. Кивалкиной с сотрудниками (1980) по изучению влияния перорального применения водно-спиртовой эмульсии прополиса на некоторые показатели естественной резистентности у поросят установлено достоверное повышение бактерицидной активности сыворотки крови на 7-е, 14-е и 21-е сутки со времени начала применения препарата.

Иммунобиологическая перестройка организма в ответ на антигенное раздражение, может сопровождаться образованием острофазовых белков. Нами изучалось влияние иммунизации сальмонеллезными вакцинами с масляно-прополисным адъювантом и адъювантом Фрейнда на синтез С-реактивного белка у телят (X. X. Абдуллин, И. И. Тетерев, 1970; И. И. Тетерев, 1970). В результате было установлено, что прополис в составе вакцин индуцирует синтез С-реактивного белка у животных. При этом положительная реакция на С-реактивный белок предшествовала активизации нейтрофилов и синтезу сальмонеллезных О- и Н-агглютининов. Подобные примеры составляют далеко не полный перечень позитивного влияния прополиса на естественную резистентность организма животных.

Наряду с повышением естественной защиты организма, прополис стимулирует иммунитет, то есть специфическую защитную реакцию. О влиянии прополиса на некоторые показатели иммунитета при совместном введении с корпускулярными и растворимыми антигенами сообщили В. П. Кивалкина, В. А. Балалыкин, 1969; В. И. Пионтковский, 1969; И. И. Тетерев, 1970; Г. А. Белозерова, 1976; Р. Т. Маннапова, А. Г. Маннапов 1983; В. П. Кивалкина, А. А. Барсков, Э. Л. Бударкова, И. Н. Исмагилов, 1980 и другие. В. И. Пионтковский (1969) наблюдал у белых крыс при введении сальмонеллезного антигена, инактивированного прополисом интенсивное образование макро- и микроглобулиновых антител (19 S и 7 S) в сравнении с контрольными животными, которым вводился формалинизированный сальмонеллезный антиген и усиление под действием прополиса плазмоклеточной реакции и продукции специфических агглютининов у кроликов (В. П. Кивалкина, В. И. Пионтковский (1969). Э. Л. Бударкова (1971) изучала влияние прополиса на иммунологические показатели при гипериммунизации кроликов столбнячным анатоксином и установила, что под влиянием прополиса наблюдается интенсивное образование антитоксинов. Например, в ее опытах с прополисом на 21 день гипериммунизации столбнячным анатоксином с прополисом содержание антитоксинов в крови кроликов составило 91,4 ± 12,9 АЕ, а у контрольных животных, гипериммунизированных тем же анатоксином, но без прополиса -41,1 ±6,0 АЕ. В работах Р. Т. Маннаповой с сотрудниками (1983, 1984) показано стимулирующее действие прополиса в составе прополисо-полиэтиленгликолевого адъюванта на клеточные факторы иммунитета. В частности, в одном из выводов своей работы она заключает, что «иммуноморфологическая картина при введении сальмонеллезного антигена совместно с полиэтиленгликолевым раствором прополиса характеризуется более выраженными изменениями в крови и лимфоидных органах:

а) увеличение числа В-лимфоцитов и уменьшение Т-лимфоцитов в крови;

б) повышение количества В-лимфоцитов и незначительное - Т-лимфоцитов в лимфатических узлах и в селезенке;

в) рост числа Т-лимфоцитов в тимусе;

г) выраженное расширение площадей В - и небольшое Т - зависимых зон;

д) увеличение селезеночного и тимического индексов;

е) в лимфатических узлах рост числа макрофагов, бластных форм, лимфоцитов, ретикулярных клеток, эозино-филов, плазматических клеток и клеток с митозами.

Несмотря, если так можно выразиться, на «иммунологическую консервативность» крупного рогатого скота, нами получено стимулирующее продукцию антител действие прополиса. В опытах по иммунизации телят против сальмонеллеза вакцинами с прополисом и без него содержание 0-агглютининов в крови животных было в 1,5 - 2,5, а Н-агглютининов - в 3 раза больше, чем у животных контрольных групп (И. И. Тетерев, 1970).

Подобные примеры действия прополиса на иммунологическую реактивность организма животных можно было бы продолжить. Но даже и этих немногочисленных извлечений из результатов исследований достаточно для того, чтобы сделать заключение о перспективности применения прополиса в качестве адъюванта при конструировании инактивированных вакцин и анатоксинов и разработке методов и схем гипериммунизации для получения высоко активных иммунных сывороток и глобулинов, а также в качестве иммуномодулятора при иммунодефицитах животных.

Для получения эффективных вакцин из убитых микробов важным условием является способ стерилизации микробной массы. Под влиянием химических (формалин, спирт, эфир, ацетон, фенол, бетапропиолактон и т.д.) и физических (высокая температура, свет, ультразвук и т.д.) факторов происходит изменение специфичности и антигенности микробных белков, что, несомненно, сказывается на иммуногенности биопрепарата. В связи с этим поиски наиболее щадящих методов стерилизации, при которых наиболее полно сохранились бы протективные антигены, представляют определенный практический интерес. В связи с возможным применением прополиса для стимуляции поствакцинального иммунитета мы изучали его влияние на агглютинабильность сальмонеллезных антигенов. Установлено, что под влиянием прополиса снижается агглютинабильность соматического и сохраняется высокая агглютинабильность флагеллярного сальмонеллезных антигенов, при этом влияние прополиса на различные фракции соматического и флагеллярного антигенов неодинаково (И. И. Тетерев, 1971).

Несмотря на многочисленные сообщения об атоксичности и безвредности препаратов прополиса многократное применение их иногда обусловливает сенсибилизацию и последующую гиперреактивность, преимущественно замедленного типа, у животных и человека (А. Н. Песчанский, 1975; А. Ф. Большакова, 1976; А. В. Артомасова, 1981; А. Кайяс, 1981; Ш. М. Омаров, 1990 и другие). «Назначая препараты прополиса, - отмечает А. Н. Песчанский, - нужно иметь ввиду, что встречаются люди, обладающие повышенной чувствительностью к нему. При этом появляется зуд, иногда высыпает сыпь. После прекращения приема прополиса эти явления исчезают».

Как правило, аллергические реакции на прополис возникают у лиц с аллергией к самим пчелам или их ужалениям, а также у лиц с каким-либо аллергическим заболеванием: бронхиальной астмой, диатезом, крапивницей и Т. А- (А. В. Артомасова, 1975). А. В. Артомасова наблюдала возникновение тяжелого приступа удушья после ингаляции с прополисом у больного бронхиальной астмой; развитие анафилактического шока после растирания 2%-й спиртовой настойкой прополиса с целью лечения радикулита у больного с аллергией кужалению пчелами. В опытах Фанг Чу (1981) при длительном пероральном применении прополиса 160 больным псориазом (по 0,3 г 2-3 раза в день в течение двух месяцев) не наблюдалось побочных токсических эффектов и аллергизации организма. Ш. М. Омаров (1990) описал несколько случаев аллергии к прополису. По его наблюдениям, здоровые животные не реагируют на введение прополиса, «а у человека аллергизация выражена сильнее». В многочисленных публикациях по применению препаратов прополиса в ветеринарной практике и собственные многолетние наблюдения подтверждают сообщение Ш. М. Омарова об отсутствии или слабо выраженном аллергенном действии препаратов прополиса на организм животных. Спектр воздействия прополиса на организм человека и животных гораздо шире и не ограничивается вышеописанными примерами и свойствами. A. Derevici et al. (1972), Н. А. Спиридонов (1994), Э. А. Лудянский (1994) и другие исследователи отмечают антионкогенное действие прополиса. Н. А. Спиридонов и В. В.Архипов (1994) изучали цитостатическую активность в отношении лимфобластоидных клеток человека Raji (лимфома Беркитта)40%-го спиртового экстракта прополиса в сравнении с синтетическими противоопухолевыми препаратами (циклофосфан, 5- фторурацил в среде ДЖЕМ («Серва») в лрисутствии эмбриональной сыворотки телят установили, что экстракт прополиса полностью подавлял рост злокачественных клеток в концентрации 50 мкг/мл и выше, что близко к концентрации циклофосфана и 5-фто-РУрацила.

Применение препаратов прополиса снижает уровень липидов в организме. Фанг Чу (1981) провел наблюдения над больными с повышенным давлением, атеросклерозом и коронарными заболеваниями, осложненными высоким уровнем сывороточных липидов (более 230 мг% холестерола и 120 мг% триглицерида). 45 больным давали прополисовые таблетки, содержащие 0,3 г прополиса, три раза в день в течение месяца. Во время лечения из пищи не исключались жиры. У большинства больных симптомы болезней исчезали и произошло значительное снижение уровня липидов в сыворотке крови.

Тетерев, 1975, 1976; Ю.С.Александров, Л. Н.Данилов, 1975; Г. А. Белозерова, 1976; В. И. Горшунова, 1973; С. Ш. Турсуналиев, 1990) и другие. В многочисленных опытах установлено, что различные виды микроорганизмов проявляют разную чувствительность к прополису. Например, в опытах В. П. Кивалкиной пастереллы на пластинках из нативного прополиса погибали через 5-20 минут, соответственно, возбудитель рожи свиней, гемолитический стрептококк -10-60 минут, стафилококки - 0,5-6 часов, сальмонеллы - 1-6 часов, эшерихии - 2-6 часов, синегнойная, чудесная палочки - 2-8 часов. Бактериостатические концентрации прополиса колебались в зависимости от вида микроорганизмов от 0,0005 до 0,1 г сухого вещества экстрагированного прополиса на 1 мл питательной среды. А. А. Барсков (1988) отмечает, что одним из объективных критериев при оценке качества прополиса являются его антимикробные свойства. В опытах с 40 образцами прополиса, собранными в различных зонах России, бактериостатическое действие прополиса проявлялось в отношении Вас. subtilis L-2, Mycobacterium B-5 в дозах от 62,5 до 250 мкг/мл, Staphylococcus aureus 209-P - от 62,5 до 500 мкг/мл, Escherchia coli О 55-4-6 мг/мл. Антимикробное действие проявляют препараты, приготовленные с использованием прополиса (мази, экстракты, водно-спиртовые эмульсии, прополисовые масла, биогели и другие). В 1959 г. В. П. Кивалкина сообщила, что воск из прополиса обладает выраженным бактерицидным действием, однако противомикробная активность воска несколько ниже таковой прополиса. В отличие от воска прополисовые мази в опытах В. П. Кивалкиной обладали более выраженной бактерицидной активностью в сравнении с прополисом. Мазь, приготовленная на беленом масле, более бактерицидна по сравнению с мазью, приготовленной на вазелиновом масле. Бактерицидным и бактериостатическим действием обладают водный (1:2) и спиртовой (1:5) экстракты (3. X. Каримова и другие, 1963). В опытах по применению прополиса при выращивании цыплят нами были изучены бактерицидные свойства водно-спиртовой эмульсии прополиса в отношении семи культур сальмонелл (S. gallinarum, S. dublin, S. cholerae-suis, S. typhimurium, S. abortus-equi, S. abortus-ovis, S. enteritidis) и шести культур энтеропатогенных эшерихий, выделенных из тушек цыплят. Бактерицидная концентрация спиртового экстракта прополиса в составе водно-спиртовой эмульсии в отношении сальмонелл составила 1,3 ± 0,22, а в отношении эшерихий 1,2 ± 0,31 %. При изучении антимикробного действия прополисовых гелей, приготовленных на основе агар-агара, желатина, крахмала, натрий-карбоксиметилцеллюлозы бактерицидные концентрации в отношении Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Bacillus cereus, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli, S. dublin варьировали в пределах 5-10 мг/мл сухого, экстрагированного спиртом, вещества прополиса. Многие исследователи отмечают более высокую чувствительность к препаратам прополиса грампозитивной бактериальной микрофлоры в сравнении с грамнегативной. При изучении бактерицидных свойств прополиса, собранного в Кировской области, нами были сделаны выводы, подтверждающие более высокую чувствительность грамположительной сапрофитной микрофлоры в сравнении с грамотрицательной и индивидуальную (штаммовую) чувствительность к прополису (И. И. Тетерев, 1976).

В отношении вирулицидного действия прополиса сведения в литературе весьма скромны. Ингибирующее действие прополиса на вирусы мозаики огурца, пятнистости табака, некроза табака, мозаики табака было установлено В. Бойнянским и В. Косляровой (1975). Самая высокая чувствительность была обнаружена у вируса некроза табака, а самая низкая - у вируса мозаики огурца. Прополис сокращает число повреждений на контаминированных вирусом листьях, затормаживает репродукцию вируса во всем растении, проявляет высокую ингибирующую активность при пониженных его концентрациях, что может иметь значение для использования его в практике мероприятий по защите культур.

Г. А. Белозерова (1976) при изучении влияния препаратов прополиса на вирус болезни Ауески делает вывод о том, что препараты прополиса in vitro обладают ингибирующим действием. Водно-спиртовая эмульсия в дозе 15 мг/мл и водный экстракт прополиса в дозе 6 мг/мл снижали титры вируса в культуре клеток ПП по сравнению с контролем на 3,5 и 4,0 Ig ТЦД50, в куриных эмбрионах - на 2,0 и 1,75 Ig ЛД50. Г. П. Демаков, И. И. Тетерев (1978) в опытах по изучению влияния прополиса наРНК-содержащие вирусы болезни Ньюкасла и гепатита утят установили, что водный экстракт прополиса с содержанием сухого вещества 25 мг/мл инактивирует вирус болезни Ньюкасла в течение 5-15 минут, в то время как вирус гепатита утят был резистентен, даже в условиях непосредственного контакта с нативньм прополисом. По-видимому различная чувствительность к прополису объясняется тем, что вирус болезни Ньюкасла имеет липопротеидную суперкапсидную оболочку и под действием прополиса происходит блокировка рецепторов вируса и ингибирование его способности адсорбироваться на чувствительных клетках. Энтеровирус гепатита утят лишен липопротеидной оболочки и прополис не оказывает на него противовирусного действия.

Наряду с антибактериальными и антивирусными свойствами прополис и его препараты проявляют выраженное фунгицидное действие (Т. В. Вахонина, 1975; Л. Въехет, 1975; А. А. Барсков, 1980). Высокую и умеренную чувствительность к прополису Л. Въехет установил у грибов Fusarium solani, Cloeckera apiculata, Saccharomyces cerevisiae, в то время как Aspergillusochraceus оказались малочувствительными. Ингибирующая зона прополиса в отношении Cloeckera apiculata составила 9,2-12 мм, Saccharomyces cerevisiae - 9,5-11 мм, Candida albicans - 8,5-9 мм. Фунгиостатическое действие различных образцов прополиса на плесневые и дрожжеподобные грибы в 80% случаев проявлялось в дозах 6-8 мг/мл; 7,5%-4 и 12,5%-10 мг/мл (А. А. Барсков, 1988).

Интересные наблюдения сделаны А. А. Барсковым (1984) при сравнительном изучении чувствительности стафилококков и стрептококков, выделенных из секрета вымени больных маститом и здоровых коров, к антибиотикам и прополису. Если среди культур стафилококков и стрептококков были антибиотикочувствительные и антибиотикорезистентные, то по отношению к прополису как те, так и другие проявляли чувствительность в равной или почти равной степени. Например, бактериостатические концентрации прополиса составили для антибиотикочувствительных стафилококков 150 ± 26,6 мкг/мл, а для антибиотикорезистентных стафилококков - 169 ± 22,7 мкг/мл, соответственно, для антибиотикочувствительных стрептококков - 81 ± 20,9 мкг/ мл, а для антибиотикорезистентных стрептококков - 75 ±23,7 мкг/мл.

В опытах по изучению антимикробного действия прополиса и антибиотиков В. И. Горшунова(1973), П. Я. Соркин, В. А. Вяхирев (1974), С. Ш. Турсуналиев (1990) отмечают повышение чувствительности микроорганизмов при сочетанном применении суббактериостатических концентраций прополиса и антибиотиков. Например, С. Ш. Турсуналиев сообщает, что минимальная бактериостатическая концентрация дибиомицина для эшерихий составляла 0,04 ЕД/мл, а на среде с суббактериостати-ческой концентрацией прополиса - 0,005 ЕД/мл.

В. П. Кивалкина (1959), Н. П. Иойриш (цитировано по К. Янешу,1975), И. И. Тетерев (1975) и другие исследователи экспериментально установили устойчивость прополиса к высоким температурам. Даже стерилизация в автоклаве при давлении пара в одну атмосферу в течение 20 минут не лишает препараты прополиса антимикробных свойств.

А. А. Барсков, Н. И. Губкина, В. А. Талан (1975) изучали антимикробную активность 7 фракций прополиса в сравнении со спиртовым экстрактом прополиса. Все фракции были более активны по отношению к Bacillus subtilis L-2, штамму вакцины Ценковского, Staph. aureus 209, чем спиртовый экстракт прополиса. Бактериостатическая концентрация эфирных масел для Bacillus subtilis составила 2 мкг/мл, соответственно, флавоноидов в сочетании с нейтральными продуктами - 30 мкг/ мл, фенолокислот - 60 мкг/мл, а спиртового экстракта прополиса - 125 мкг/мл; для, Staph. aureus 30, и 250 мкг/мл.

Таким образом, из анализа далеко не полного перечня результатов экспериментальных исследований отечественных и иностранных авторов можно сделать обобщение о том, что прополис обладает выраженным с широким спектром антимикробным действием в нативном состоянии и в составе препаратов. Прополис усиливает антимикробное действие антибиотиков, а действие высоких температур не отражается на его антимикробных свойствах. При длительном применении препаратов прополиса не установлено появление прополисорезистентных штаммов микроорганизмов.

В связи с изучением химического состава прополиса и индикации в его составе флавоноидов, обладающих антиокислительными свойствами, были изучены таковые и у прополиса. В 1920 г. Н. В. Анашина сообщила о том, что добавка 1% светлой фракции прополиса к непищевым жирам увеличивает срок их хранения в 18 раз, 0,1% - в 12 раз и может быть рекомендована для консервирования непищевых жиров. В опытах В. Н. Ушаковой и Т. П. Мурыхнич (1973) флавоноиды, извлеченные из прополиса, в концентрации 0,2% значительно замедляли поглощение кислорода олеиновой кислотой. Ими разработан и внедрен в промышленность способ обработки рыбы, позволяющий увеличить сроки ее хранения в 2-3 раза. Изучение антиокислительных свойств прополиса представляет интерес не только для некоторых отраслей пищевой промышленности и парфюмерии, но также для медицины и биологии.

В. Н. Присич (1975) установил дезодорирующее свойство прополиса. В опытах с тампонами содержимого уха больных хроническим гнойным отитом и кусочками мяса с гнилостным запахом, погруженными в 20%-й раствор прополиса, устранялись неприятные запахи. Дезодорирующую способность прополиса В. Н. Присич связывает с сильным бактерицидным и бактериостатическим действием, обволакивающим свойством, а также сравнительно сильным бальзамическим запахом.

ДЕЙСТВИЕ ПРОПОЛИСА НА ОРГАНИЗМ ЖИВОТНЫХ И ЧЕЛОВЕКА

В связи с повышенным интересом к прополису, как к перспективному фармацевтическому сырью, исследования его в 50-60-х годах были сосредоточены на изучении не только антимикробных свойств и химического состава, но и безвредности для организма животных и человека.

В 1959 г. В. П. Кивалкиной опубликованы результаты испытаний препаратов прополиса на безвредность. Водные экстракты прополиса (от 1:10 до 1:100) при внутрибрюшинном и подкожном введениях в больших дозах (до 10 мл) были безвредны для организма лабораторных животных. Однако, как отмечает В. П. Кивалкина, введение неразведенного и сильно концентрированного (1:1) перегона прополиса вызывает некроз ткани в области введения препарата и даже гибель животных. А. А. Аристов (1962) скармливал кроликам прополисовое молоко (5-40%-й концентрации) в дозах от 5 до 600 мл в сутки и установил, что «при внутреннем применении кроликам оказалось безвредным». В одном из выводов статьи А. А. Аристов резюмирует: «Применение 5-40%-го прополисового молока в больших дозах (до 600 мл) в наших опытах на кроликах не вызывало какого-либо клинически видимого влияния на общее состояние кроликов и состав их крови, а также не нарушало воспроизводительной функции у самок». Безвредность прополисового молока для животных подтверждена И. Ф. Казаковым (1962) в опытах на ягнятах и поросятах, экстракта прополиса С. Г. Покровским (1962) в опытах на утятах. В последующие годы при разработке лечебно-профилактических препаратов многие исследователи отмечали безвредность для животных разных видов прополиса, включенного в состав этих препаратов (В. А. Балалыкин, 1969; А. В. Дунявин, 1969; В. И. Пионтковский, 1970; И. И. Тетерев, 1970; А. И. Балалыкина, 1972; Э. Л. Бударкова, 1972; Г. А. Белозерова, 1976; В. П. Кивалкина, А. А. Барсков, М. Г. Миролюбов, А. С. Аладышкин, 1978; Р. Т. Маннапова, 1984; А. А. Барсков, 1988; С. Ш. Турсуналиев, 1990 и другие).

В опытах по изучению токсичности прополиссодержащих препаратов биогель 5 и биогель 10 на десятках лабораторных животных (белые мыши, морские свинки, кролики) мы ни в одном случае при введении максимально переносимых доз не наблюдали гибели животных, а лишь отмечали легкое угнетение, а затем кратковременный наркоз в связи с наличием в составе препаратов этанола. Располагая богатым экспериментальным материалом по применению препаратов прополиса в ветеринарии, А. А. Барсков (1988) пишет: «Препараты прополиса (он работал с настойками, экстрактами, суспензиями, растворами при внутреннем и аэрозольном применении, линиментами, мазями, суппозиториями при наружном и внутриполостном введении - И. Т.) не токсичны, не вызывают раздражающего действия и при внутривымянном введении не влияют на качество молока. Противопоказания к их применению не установлены».

Исключительно ценными и практически значимыми являются результаты исследований по изучению влияния прополиса на обменные процессы в организме животных. Изучая влияние прополиса на некоторые иммунобиологические показатели здоровых и экспериментально зараженных уток С. Г. Покровский (1965) установил, что применение водного экстракта прополиса способствует увеличению количества общего белка в сыворотке крови здоровых уток с 3,8 до 4,4 г% и гамма-глобулинов с 25,7 до 34,2%. Содержание альбуминов незначительно и постепенно снижалось, а в отношении бета-глобулинов закономерных изменений не установлено. В. А. Балалыкин (1969) при иммунизации сальмонеллезным формолантигеном с прополисом кроликов не наблюдал увеличения количества общего белка и отмечал увеличение содержания в сыворотке крови альфа- и бета-глобулинов.

В наших опытах (И. И. Тетерев, 1970) у телят, иммунизированных сальмонеллезной вакциной с маслянопропо-лисным адъювантом, содержание общего белка, альбуминов, альфа- и бета-глобулинов сохранялось на уровне телят контрольной группы и наблюдалась выраженная стимуляция синтеза гамма-глобулинов. В 1994-1995 гг. нами выполнены исследования по изучению влияния скармливания водно-спиртовой эмульсии прополиса на минеральный и белковый обмен у поросят. Из анализа результатов опытов (И. И. Тетерев, В. И. Белорыбкин, 1995) следует, что в содержании фосфора, кальция, магния, и белка в крови у животных опытной и контрольной групп существенных различий нет. В то же время содержание мочевины у поросят опытной группы было в пределах физиологической нормы (20-28 мг%), а у животных контрольной группы наблюдались выраженная уремия (49,7 мг%). Нормализация содержания мочевины в сыворотке крови животных, получавших водно-спиртовую эмульсию прополиса, свидетельствует о хорошем усвоении белка и оптимизации белкового обмена. Применение прополиссодержащих препаратов не вызывает достоверных изменений в составе крови. Например, Р. Т. Маннапова (1982) сообщает, что в периферической крови кроликов через 10 дней с начала курса введения полиэтиленгликолевого раствора прополиса отмечался умеренный лейкоцитоз, эритремия и небольшой сдвиг соотношения форменных элементов белой крови в виде уменьшения количества палочкоядерных и сегментоядерных нейтрофилов и увеличения содержания лимфоцитов. Заметных макроскопических и гистологических изменений в сердце, легких, печени, желудке и кишечнике опытных животных в отличие от контрольных не наблюдали. К концу наблюдений (через 1 месяц) все указанные отклонения в морфологических показателях крови нормализовались и приблизились к их уровню у контрольных животных.

В наших опытах по применению водно-спиртовой эмульсии прополиса для профилактики диареи новорожденных телят гематограмма у животных опытной группы была в пределах нормы и отражала закономерные изменения возрастного характера, в то же время, у телят контрольной группы содержание эритроцитов и лейкоцитов было повышенным в результате сильной дегидратации организма, обусловленной диареей (И. И. Тетерев, В. Н. Усов, Н. А. Савельева, 1993).

Прополис интенсифицирует обмен веществ в организме животных, что проявляется в стимуляции их роста и развития. Более подробно результаты исследований по применению прополиса для этих целей будут изложены в соответствующем разделе книги.

Ш. Кэлэуз, М. Корчог (1982) установили участие прополиса в регуляции эндокринной системы: влияет непосредственно на систему гипофиз - кора надпочечников, способствует выделению кортикостероидов и подавляет активность вилочковой и панкреатической желез.

В 1957 г. Н. Н. Прокопович (цитировано по Н. П. Иойришу, 1966) сообщил об экспериментальных работах по изучению местного анестезирующего действия прополиса. Исследования показали, что анестезирующая сила 0,25%-го раствора прополиса превосходит действие кокаина и новокаина. Из опытов следует, что анестезирующее действие обеспечивают эфирные масла прополиса. 0,25%-й раствор эфирного масла прополиса вызывает полную анестезию в течение 12,5 минут. Раствор прополиса той же концентрации после отгонки эфирного масла анестезирующим действием не обладал. В опытах Ц. Цакова(1975) при проведении полостных операций на овцах и собаках подтверждены анестезирующие свойства прополиса как при общем, так и при местном применении водных гидроспиртовых экстрактов прополиса. При пероральном применении спиртового экстракта прополиса Ц. Цаков отмечает, что через 15-20 минут наступает хорошая анестезия. При интраперитонеальном введении водного экстракта прополиса получен такой же анестезирующий эффект как и при пероральном. У овец, которым сделали лапаротомию после местного применения прополиса, эффект анестезии проявился через 2-5 минут после применения и продолжался 45 минут. У собаки, анестезированной прополисом с 0,25%-м новокаином в пропорции 1:1, анестезия наступала быстрее (через 1 -2 минуты) и условия для операции были лучше. На основании результатов опытов Ц. Цаков делает выводы о том, что анестезия гидроспиртовым экстрактом прополиса, примененным местно в виде инфильтрации, аналогична анестезии 5% раствором новокаина. Прополис хорошо анестезирует область предстоящей операции, если применять его водный экстракт 1:1. Спиртовой экстракт прополиса, применяемый перорально из расчета 0,012 г/кг веса, оказывает хороший анестезирующий эффект. Независимо от способа применения экстракты прополиса не оказывали отрицательного влияния на животных даже в послеоперационном периоде.

Хорошее местное анестезирующее действие 2-4%-го спиртового раствора прополиса отметили В. С. Шевченко, Ф. Л. Шульман (1969) при гиперестезии твердых тканей зуба, при обезболивании патологических десновых карманов, а водный экстракт прополиса (30 г прополиса на 100 мл дистиллированной воды) при применении в виде аппликаций в чистом виде или в виде кашицы с белой глиной устраняет жжение, боль, стимулирует эпите-лизацию эрозий и трещин при лечении заеды, кандидомикозе слизистой оболочки ротовой полости, хейлитах, глоссальгии. 3. Г. Чанышев (1963) применял с лечебной целью 15%-ю прополисовую мазь на вазелине с ланолином при ящурных поражениях кожи сосков у коров. Через 10-15 минут после нанесения мази животные при дойке не проявляли беспокойства. Анастезирующее действие прополисовой мази продолжалось более двух часов и не уступало таковому новокаиновой мази. Заживление пораженных участков кожи сосков при использовании прополисовой мази наступало в течение 3-16 дней в зависимости от степени поражения. И это далеко не полный перечень опубликованных материалов научных исследований и наблюдений из практической ветеринарии и медицины, подтверждающих обезболивающие свойства прополиса.

В последние три десятилетия внимание исследователей привлекает способность препаратов прополиса стимулировать факторы естественной резистентности и иммунитета. В 1963 г. на Всесоюзной конференции, посвященной 90-летию Казанского ветеринарного института В. П. Кивалкина сообщила, что прополис повышает комплементарную активность, ускоряет процесс фагоцитоза, увеличивает количество пропердина и стимулирует антителообразование. Это сообщение определило новое направление в изучении прополиса. В 1968 г. В. А. Балалыкин изучал влияние паратифозного антигена с прополисным адъювантом на активность комплемента и лизоцима кроликов. У животных, обработанных антигеном с прополисом, исходное количество комплемента по группе выражалось величиной 1:11, а на 30-й и 106-й дни после иммунизации титр комплемента у них равнялся разведению сыворотки 1:20; через 140-196 дней были зарегистрированы самые высокие титры, которые, соответственно, выражались отношениями 1:25 и 1:28. В других группах (с полным и неполным адъювантами Фрейнда-И.Т.) подобного увеличения активности комплемента не наблюдалось. Содержание лизоцима в сыворотке крови кроликов, иммунизированных антигеном с прополисным стимулятором, повышалось на 10-й день после вакцинации с 1:76 до 1:107, а на 30-й, 40-й и 50-й дни регистрировалось резкое уменьшение этого фермента. В контрольных группах животных, вакцинированных тем же антигеном с адъювантами Фрейнда и антигеном без адъюванта содержание лизоцима после иммунизации снижалось во все дни исследований. О повышении комплементарной активности сыворотки крови различных видов животных, иммунизированных различными антигенами в сочетании с прополисным адъювантом, сообщали А. И. Балалыкина (1970), Э. Л. Бударкова, В. П. Кивалкина (1971), С. Ш.Турсуналиев(1990) и другие исследователи. Установлено стимулирующее действие прополиса на фагоцитарную реакцию организма животных (А. В. Дунявин, 1967; И. И. Тетерев, 1969; В. П. Кивалкина, А. А. Барсков, Э. Л. Бударкова, 1980 и другие). В 1969 году мы изучали влияние прополиса на поствакцинальную фагоцитарную реакцию телят, иммунизированных концентрированной формолвакциной с прополисом из расчета 5 мг (первая группа) и 12,5 мг прополисного бальзама (вторая группа) на килограмм живой массы животного. Контролем служили вакцинированные той же вакциной, но без прополиса (третья группа) и невакцинированные животные (четвертая группа). Схема и результаты опыта приведены в табл. 1.

Таблица 1

Влияние прополиса на поствакцинальную фагоцитарную реакцию нейтрофилов, у иммунизированных против паратифа телят

Группа животных
Вакцина
Доза (мл)
Кратность введения
Показатель фагоцитарной активности нейтрофилов

до вакцинации
после вакцинации через (дней)

15
30
45
60
90
120

1
Концентрированная формолквасцовая с прополисом
1,0
1
2,2
7,7
15,6
18,8
21,7
25,3
16,2

2
То же
1,0-1,5
2
2,1
13,7
20,4
27,0
28,8
24,8
18,6

3
То же без прополиса
1,0-1,5
2
1,9
8,5
16,4
20,8
17,9
11,2
7,2

4
Не вакцинировали
-
-
2,6
3,3
3,8
3,8
3,5
3,2
3,5

При выполнении опыта установлена безвредность формолквасцовой вакцины против паратифа с прополисом для телят. Из 20 телят, привитых вакциной с прополисом в пятисуточном возрасте, ни у одного животного не было отмечено выраженных поствакцинальных осложнений. Из приведенных в таблице данных опыта видно, что прополис в составе вакцины против паратифа стимулирует фагоцитарную активность нейтрофилов в первые дни после вакцинации телят. Показатель фагоцитарной активности нейтрофилов через 15 дней после вакцинации у телят второй группы был равен 13,7, в то время как у телят третьей группы - 8,5. В первой группе телят нарастание фагоцитарной реакции продолжалось до трех месяцев, тогда как у телят второй группы верхняя граница фагоцитарной реакции отмечена через два месяца и третьей группы - через полтора месяца после вакцинации. Эти результаты позволяют предположить пролонгирование поствакцинальной фагоцитарной реакции прополисом. Выравнивание показателей фагоцитоза у телят первой и второй групп косвенно указывает на оптимальные стимулирующие фагоцитоз дозы прополиса (5 мг сухих экстрактивных веществ прополиса на один килограмм живой массы животного). Начиная с 60-го дня поствакцинального периода показатель фагоцитарной активности нейтрофилов у телят первой группы был выше, чем у телят третьей группы, причем через 3 и 4 месяца после вакцинации эта разница увеличилась почти в 2,3 раза. Незначительная разница в показателях фагоцитарной активности нейтрофилов у телят первой и третьей групп через 15, 30 и 45 дней после вакцинации объясняется кратностью и количеством введенного антигена. Фагоцитарная активность нейтрофилов у не вакцинированных телят (четвертая группа) на протяжении опыта была без существенных колебаний. Обобщая результаты опыта, мы сделали вывод о том, что прополис в составе вакцины против паратифа стимулирует фагоцитарную активность нейтрофилов и пролонгирует поствакцинальную стимуляцию фагоцитоза у телят.

Одним из показателей, объективно отражающих состояние естественной резистентности организма животных, является бактерицидная активность сыворотки крови. При изучении иммуностимулирующих свойств прополиса некоторые исследователи в своей работе небезуспешно пользовались этим тестом (Р. Т. Маннапова, 1982; В. П. Кивалкина, А. А. Барсков, Э. Л. Бударкова, И. Н. Исмагилов, 1980; В. П. Кивалкина, С. Ш. Турсуналиев, 1988 и другие). В опытах В. П. Кивалкиной с сотрудниками (1980) по изучению влияния перорального применения водно-спиртовой эмульсии прополиса на некоторые показатели естественной резистентности у поросят установлено достоверное повышение бактерицидной активности сыворотки крови на 7-е, 14-е и 21-е сутки со времени начала применения препарата.

Иммунобиологическая перестройка организма в ответ на антигенное раздражение, может сопровождаться образованием острофазовых белков. Нами изучалось влияние иммунизации сальмонеллезными вакцинами с масляно-прополисным адъювантом и адъювантом Фрейнда на синтез С-реактивного белка у телят (X. X. Абдуллин, И. И. Тетерев, 1970; И. И. Тетерев, 1970). В результате было установлено, что прополис в составе вакцин индуцирует синтез С-реактивного белка у животных. При этом положительная реакция на С-реактивный белок предшествовала активизации нейтрофилов и синтезу сальмонеллезных О- и Н-агглютининов. Подобные примеры составляют далеко не полный перечень позитивного влияния прополиса на естественную резистентность организма животных.

Наряду с повышением естественной защиты организма, прополис стимулирует иммунитет, то есть специфическую защитную реакцию. О влиянии прополиса на некоторые показатели иммунитета при совместном введении с корпускулярными и растворимыми антигенами сообщили В. П. Кивалкина, В. А. Балалыкин, 1969; В. И. Пионтковский, 1969; И. И. Тетерев, 1970; Г. А. Белозерова, 1976; Р. Т. Маннапова, А. Г. Маннапов 1983; В. П. Кивалкина, А. А. Барсков, Э. Л. Бударкова, И. Н. Исмагилов, 1980 и другие. В. И. Пионтковский (1969) наблюдал у белых крыс при введении сальмонеллезного антигена, инактивированного прополисом интенсивное образование макро- и микроглобулиновых антител (19 S и 7 S) в сравнении с контрольными животными, которым вводился формалинизированный сальмонеллезный антиген и усиление под действием прополиса плазмоклеточной реакции и продукции специфических агглютининов у кроликов (В. П. Кивалкина, В. И. Пионтковский (1969). Э. Л. Бударкова (1971) изучала влияние прополиса на иммунологические показатели при гипериммунизации кроликов столбнячным анатоксином и установила, что под влиянием прополиса наблюдается интенсивное образование антитоксинов. Например, в ее опытах с прополисом на 21 день гипериммунизации столбнячным анатоксином с прополисом содержание антитоксинов в крови кроликов составило 91,4 ± 12,9 АЕ, а у контрольных животных, гипериммунизированных тем же анатоксином, но без прополиса -41,1 ±6,0 АЕ. В работах Р. Т. Маннаповой с сотрудниками (1983, 1984) показано стимулирующее действие прополиса в составе прополисо-полиэтиленгликолевого адъюванта на клеточные факторы иммунитета. В частности, в одном из выводов своей работы она заключает, что «иммуноморфологическая картина при введении сальмонеллезного антигена совместно с полиэтиленгликолевым раствором прополиса характеризуется более выраженными изменениями в крови и лимфоидных органах:

а) увеличение числа В-лимфоцитов и уменьшение Т-лимфоцитов в крови;

б) повышение количества В-лимфоцитов и незначительное - Т-лимфоцитов в лимфатических узлах и в селезенке;

в) рост числа Т-лимфоцитов в тимусе;

г) выраженное расширение площадей В - и небольшое Т - зависимых зон;

д) увеличение селезеночного и тимического индексов;

е) в лимфатических узлах рост числа макрофагов, бластных форм, лимфоцитов, ретикулярных клеток, эозино-филов, плазматических клеток и клеток с митозами.

Несмотря, если так можно выразиться, на «иммунологическую консервативность» крупного рогатого скота, нами получено стимулирующее продукцию антител действие прополиса. В опытах по иммунизации телят против сальмонеллеза вакцинами с прополисом и без него содержание 0-агглютининов в крови животных было в 1,5 - 2,5, а Н-агглютининов - в 3 раза больше, чем у животных контрольных групп (И. И. Тетерев, 1970).

Подобные примеры действия прополиса на иммунологическую реактивность организма животных можно было бы продолжить. Но даже и этих немногочисленных извлечений из результатов исследований достаточно для того, чтобы сделать заключение о перспективности применения прополиса в качестве адъюванта при конструировании инактивированных вакцин и анатоксинов и разработке методов и схем гипериммунизации для получения высоко активных иммунных сывороток и глобулинов, а также в качестве иммуномодулятора при иммунодефицитах животных.

Для получения эффективных вакцин из убитых микробов важным условием является способ стерилизации микробной массы. Под влиянием химических (формалин, спирт, эфир, ацетон, фенол, бетапропиолактон и т.д.) и физических (высокая температура, свет, ультразвук и т.д.) факторов происходит изменение специфичности и антигенности микробных белков, что, несомненно, сказывается на иммуногенности биопрепарата. В связи с этим поиски наиболее щадящих методов стерилизации, при которых наиболее полно сохранились бы протективные антигены, представляют определенный практический интерес. В связи с возможным применением прополиса для стимуляции поствакцинального иммунитета мы изучали его влияние на агглютинабильность сальмонеллезных антигенов. Установлено, что под влиянием прополиса снижается агглютинабильность соматического и сохраняется высокая агглютинабильность флагеллярного сальмонеллезных антигенов, при этом влияние прополиса на различные фракции соматического и флагеллярного антигенов неодинаково (И. И. Тетерев, 1971).

Несмотря на многочисленные сообщения об атоксичности и безвредности препаратов прополиса многократное применение их иногда обусловливает сенсибилизацию и последующую гиперреактивность, преимущественно замедленного типа, у животных и человека (А. Н. Песчанский, 1975; А. Ф. Большакова, 1976; А. В. Артомасова, 1981; А. Кайяс, 1981; Ш. М. Омаров, 1990 и другие). «Назначая препараты прополиса, - отмечает А. Н. Песчанский, - нужно иметь ввиду, что встречаются люди, обладающие повышенной чувствительностью к нему. При этом появляется зуд, иногда высыпает сыпь. После прекращения приема прополиса эти явления исчезают».

Как правило, аллергические реакции на прополис возникают у лиц с аллергией к самим пчелам или их ужалениям, а также у лиц с каким-либо аллергическим заболеванием: бронхиальной астмой, диатезом, крапивницей и Т. А- (А. В. Артомасова, 1975). А. В. Артомасова наблюдала возникновение тяжелого приступа удушья после ингаляции с прополисом у больного бронхиальной астмой; развитие анафилактического шока после растирания 2%-й спиртовой настойкой прополиса с целью лечения радикулита у больного с аллергией кужалению пчелами. В опытах Фанг Чу (1981) при длительном пероральном применении прополиса 160 больным псориазом (по 0,3 г 2-3 раза в день в течение двух месяцев) не наблюдалось побочных токсических эффектов и аллергизации организма. Ш. М. Омаров (1990) описал несколько случаев аллергии к прополису. По его наблюдениям, здоровые животные не реагируют на введение прополиса, «а у человека аллергизация выражена сильнее». В многочисленных публикациях по применению препаратов прополиса в ветеринарной практике и собственные многолетние наблюдения подтверждают сообщение Ш. М. Омарова об отсутствии или слабо выраженном аллергенном действии препаратов прополиса на организм животных. Спектр воздействия прополиса на организм человека и животных гораздо шире и не ограничивается вышеописанными примерами и свойствами. A. Derevici et al. (1972), Н. А. Спиридонов (1994), Э. А. Лудянский (1994) и другие исследователи отмечают антионкогенное действие прополиса. Н. А. Спиридонов и В. В.Архипов (1994) изучали цитостатическую активность в отношении лимфобластоидных клеток человека Raji (лимфома Беркитта)40%-го спиртового экстракта прополиса в сравнении с синтетическими противоопухолевыми препаратами (циклофосфан, 5- фторурацил в среде ДЖЕМ («Серва») в лрисутствии эмбриональной сыворотки телят установили, что экстракт прополиса полностью подавлял рост злокачественных клеток в концентрации 50 мкг/мл и выше, что близко к концентрации циклофосфана и 5-фто-РУрацила.

Применение препаратов прополиса снижает уровень липидов в организме. Фанг Чу (1981) провел наблюдения над больными с повышенным давлением, атеросклерозом и коронарными заболеваниями, осложненными высоким уровнем сывороточных липидов (более 230 мг% холестерола и 120 мг% триглицерида). 45 больным давали прополисовые таблетки, содержащие 0,3 г прополиса, три раза в день в течение месяца. Во время лечения из пищи не исключались жиры. У большинства больных симптомы болезней исчезали и произошло значительное снижение уровня липидов в сыворотке крови.